显微镜测微尺测定细胞大小的原理和步骤:
使用显微镜测微尺测定微生物细胞大小的原理
微生物细胞的大小是微生物分类鉴定的重要依据之一。微生物个体微小,必
须借助于显微镜才能观察,要测量微生物细胞大小,也必须借助于特殊的测微计在显微镜下进行测量。
显微测微计由镜台测微尺(stage micrometer)和目镜测微尺(ocular micrometer)两部分组成。
镜台测微尺是一块中央有刻玻片(图 2-7),刻度的总长爲 l mm,等分爲100 小格,每小格长 10 μm,
于对目镜测微计进行标定的。目镜测微尺可直接用于测量细胞大小,它是一块圆形玻片(图 2-8),其中央有等分到度,测
量时将其放在接目镜中的隔板上。目镜测微尺刻度的总长爲 l cm,等分爲 100 小格,每小格长 100 μm,
由于目镜测微尺所测量的是微生物细胞经过显微镜放大之后所成像的大小,刻度实际代表的长度随使用的目镜和物镜放大倍数及镜筒的
长度而改变,所以,使用前须先用镜台测微计进行标定,求出某一放大率下,目镜测微尺每一小格所代表的长度,然后用目镜测微计直接测被测物件的大小。
一个目镜测微尺刻度校正因子(calibration factor)的计算:一个目镜测微尺刻度
(μ = 镜台测微尺上二重迭线间已知的距离 / 该二重迭线m)间目镜测微尺的刻度
例 1: 假如二重迭线间已知的距离为 2 个镜台测微尺刻度(2 X 10 μ
m),对应 13个目镜测微尺刻度,则
每一目镜测微尺刻度的校正因子 = 20 μm / 13 = 1.54 μm
例 2: 假如以显微镜目镜测微尺观察某一微生物,长度为 5 个目镜测微尺刻度,则
微生物长度 = 目镜测微尺测量的刻度数 X 每一目镜测微尺刻度的校正因子
= 5 X 1.54 μm = 7.70 μm